TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒是一種用于檢測細胞凋亡過程中細胞核DNA斷裂的試劑盒,其原理基于末端脫氧核糖核苷酸轉移酶(TdT Enzyme)的作用,能夠特異性地標記凋亡細胞,在科研領域應用廣泛。
細胞凋亡時,基因組DNA會發生斷裂,暴露出3'-羥基(3'-OH)末端。TUNEL試劑盒利用TdT酶將標記的核苷酸(如生物素-dUTP、FITC-dUTP或紅色熒光素KeyFluor555-dUTP)連接到這些斷裂的DNA末端,通過后續顯色或熒光檢測,特異性定位凋亡細胞。
TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒類型與特點:
根據標記物和檢測方法的不同,TUNEL試劑盒可分為以下類型:
顯色型(POD法)
標記物:生物素-dUTP + 辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親和素。
顯色反應:HRP催化DAB(二氨基聯苯胺)產生棕色沉淀,光學顯微鏡下觀察。
特點:無需熒光設備,成本低,適合普通實驗室;但靈敏度略低于熒光法。
熒光型(FITC/TMR/KeyFluor555標記)
標記物:FITC-dUTP、TMR-dUTP或KeyFluor555-dUTP。
檢測方法:熒光顯微鏡或流式細胞儀觀察。
特點:
高靈敏度:可檢測早期凋亡細胞。
多色檢測:可與DAPI(核染色)或其他熒光標記聯用,實現多參數分析。
快速簡便:部分熒光型試劑盒支持一步染色,縮短實驗時間。